反相色譜柱的“填料化學(xué)”在決定分離選擇性方面起著至關(guān)重要的作用。這種選擇性主要由填料的物理和化學(xué)特性共同決定，具體體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：

　　一、填料的物理特性

　　1.基質(zhì)材料：

　　常見(jiàn)的基質(zhì)材料有硅膠和聚合物。硅膠基質(zhì)剛性大，不易溶脹，但需注意在高或低pH值下可能會(huì)溶解，多用于小分子分離。聚合物基質(zhì)剛性較小，孔結(jié)構(gòu)復(fù)雜，孔徑不均勻可能導(dǎo)致柱效不夠高，但其在整個(gè)pH范圍內(nèi)都較穩(wěn)定，且有機(jī)溶劑不會(huì)導(dǎo)致聚合物基質(zhì)溶脹，因此多用于大分子分離。

　　2.鍵合相（固定相、官能團(tuán)）：

　　鍵合相的種類(lèi)和數(shù)量直接影響填料的選擇性。例如，C18鍵合相（即十八烷基硅烷，ODS）是一種常見(jiàn)的反相填料，其對(duì)非極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的保留能力。此外，鍵合相的穩(wěn)定性也至關(guān)重要，它決定了填料在不同條件下的使用壽命。

　　3.形狀與粒度：

　　球形填料能夠降低柱壓，延長(zhǎng)色譜柱壽命，且重現(xiàn)性和高穩(wěn)定性較好。粒度較小的填料柱效較高，但會(huì)引起柱壓過(guò)高。因此，在選擇填料時(shí)，需要權(quán)衡柱效和柱壓之間的關(guān)系。

　　4.孔徑與比表面積：

　　大孔的填料顆?？梢匝娱L(zhǎng)溶質(zhì)大分子在填料表面滯留的時(shí)間，達(dá)到充分分離并改善峰形。而較小的孔徑則提供較高的比表面積，可用于較大的載荷量，并保留小的有機(jī)化合物。
 

　　二、填料的化學(xué)特性

　　1.極性封尾與極性嵌入：

　　極性封尾可以減小活性硅羥基與堿性基團(tuán)之間的離子交換作用，從而避免峰形拖尾現(xiàn)象。極性嵌入則可以增加填料與溶質(zhì)之間的相互作用力，提高分離選擇性。

　　2.碳載量（碳覆蓋率）：

　　碳載量是指參與反應(yīng)的硅醇基數(shù)目占硅膠表面硅醇基總數(shù)的比例。反相色譜柱對(duì)小分子化合物的分離選擇性影響較大。一般來(lái)說(shuō)，碳載量越高，填料對(duì)非極性物質(zhì)的保留能力越強(qiáng)。

　　3.pH值范圍：

　　填料的pH值穩(wěn)定性決定了其在不同條件下的適用范圍。例如，硅膠在堿性條件下易溶解，而鍵合相在酸性條件下易水解。因此，在選擇填料時(shí)，需要考慮待分離物質(zhì)的pH值范圍以及填料的穩(wěn)定性。

　　4.溫度范圍：

　　填料的溫度穩(wěn)定性也是影響其選擇性的重要因素。一般來(lái)說(shuō)，較高的柱溫能夠顯著降低色譜柱壓力并加快傳質(zhì)速率，進(jìn)而提高柱效。但需要注意的是，過(guò)高的溫度也可能導(dǎo)致填料結(jié)構(gòu)的破壞或性能下降。

　　反相色譜柱的填料化學(xué)通過(guò)其物理和化學(xué)特性共同決定了分離選擇性。在選擇填料時(shí)，需要根據(jù)待分離物質(zhì)的性質(zhì)以及分離要求來(lái)綜合考慮這些因素，以達(dá)到理想的分離效果。